GB 5413.36-2010发布稿 婴幼儿食物跟乳品中反式脂肪酸的测定 发布稿.rarGB 5413.36-2010发布稿 婴幼儿食物跟乳品中反式脂肪酸的测定 发布稿.rar

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中华人平易近共跟国国家规范中华人平易近共跟国国家规范 GB 5413.362010 食物僻静国家规范 婴幼儿食物跟乳品中反式脂肪酸的测定 National food safety standard Determination of trans fatty acids in foods for infants and young children, milk and milk products 中 华 人 平易近 共 跟 国 卫 生 部中 华 人 平易近 共 跟 国 卫 生 部 发布 2010-03-26 发布 2010-06-01 实行 GB 5413.362010 I 前 言 本标准附录 A 为资料性附录。 本规范系首次发布。 GB 5413.362010 1 食物僻静国家规范 婴幼儿食物跟乳品中反式脂肪酸的测定 1 规模 本规范规则了婴幼儿食物跟乳品中反式脂肪酸的测定方法。 本规范适用于婴幼儿食物跟乳品中反式脂肪酸的测定。 2 模范性援用文件 本规范中援用的文件关于本规范的应用是必不可少的。 素日注日期的援用文件, 仅所注日期的版本 适用于本规范。素日不注日期的援用文件,其最新版本(包含全部的修正单)适用于本规范。 3 道理 试样中的脂肪用溶剂提取。 提取物在碱性前提下与甲醇回声生成脂肪酸甲酯, 用配有氢火焰离子化 检测器的气相色谱仪疏散顺式脂肪酸甲酯跟反式脂肪酸甲酯,外标法定量。 4 试剂跟原料 除非尚有规则,本方法所用试剂均为剖析纯,水为GB/T 6682规则的一级水。 4.1 煤油醚沸程 30 ℃~60 ℃。 4.2 乙醚(C4H10O)。 4.3 乙醇(C2H6O)体积分数为 95 。 4.4 正几椋–6H14)色谱纯。 4.5 氨水(NH3·H2O)25 ~28 。 4.6 氢氧化钾(KOH)。 4.7 甲醇(CH4O)。 4.8 淀粉酶生气盼望单元1.5 U/mg,依据生气盼望单元年夜小调处用量。 4.9 无水硫酸钠(Na2SO4。 4.10 氢氧化钾-甲醇溶液(4 mol/L)称取 26.4 g 氢氧化钾,溶于约 80 mL 甲醇中。冷却至室温,用 甲醇定容至 100 mL,介入约 5g 无水硫酸钠(4.9),充分搅拌后过滤,保管滤液。 4.11 脂肪酸甲酯规范品十八酸甲酯(C180)、反-9-十八碳一烯酸甲酯(C181-9t)、顺-9-十八碳 一烯酸甲酯(C181-9c)、反-9,12-十八碳二烯酸甲酯(C182-9t,12t)、顺-9,12-十八碳二烯酸甲酯 (C182-9c,12c),放入冰箱在-15 ℃以下生涯。 GB 5413.362010 2 4.12 反式脂肪酸甲酯规范蕴藏液浓度区分为 10.0 mg/ mL。称取 500 mg(准确到 0.1 mg)反-9-十八 碳一烯酸甲酯规范品跟反-9,12-十八碳二烯酸甲酯规范品,区分用正几橄融并定容至 50.0 mL。放入 冰箱在-15 ℃以下生涯。 4.13 反式脂肪酸甲酯规范中央液 浓度区分为 1.0 mg/ mL。 区分吸取两种反式脂肪酸甲酯规范蕴藏液 (4.12)10.0 mL 入统一 100 mL 容量瓶中并用正几椋4.4)定容。临用前配制。亦作为规范曲线最高 点。 4.14 反式脂肪酸甲酯规范变乱液临用前配制。区分吸取反式脂肪酸甲酯规范中央液(4.13),0、 2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL 于 10 mL 容量瓶中,用正几槎ㄈ荩此浓度即为 0、0.2、0.4、0.6、0.8 、 1.0 mg/mL 的规范变乱液。 4.15 脂肪酸甲酯规范混杂液将脂肪酸甲酯规范品(4.11),用正几榕渲瞥芍肪酸甲酯规范混杂溶 液,其中每种要素的浓度约为 0.05 mg/mL 至 0.5 mg/mL。用于举行顺反脂肪酸甲酯疏散水平及定性的 判定。 4.16 刚果红溶液称取 1 g 刚果红消融稀释至 100 mL。 5 仪器跟设备 5.1 气相色谱仪,带氢火焰离子化检测器。 5.2 改动蒸发器。 5.3 恒温水浴40 ℃~80 ℃。 5.4 涡旋振荡器。 5.5 离心计心情转速≥4000 转/分钟。 5.6 毛氏抽脂瓶。 5.7 毛氏抽脂瓶摇混器。 5.8 脂肪搜集瓶圆底烧瓶,与改动蒸发仪配套。 5.9 天平感量为 0.1 mg。 6 剖析措施 6.1 试样处置处分 6.1.1 含淀粉的试样称取混杂平均的固体试样约 1.5 g,液体试样约 5 g(准确到 0.1 mg)于毛氏抽 脂瓶中,介入约 0.1 g 淀粉酶(酶生气盼望 1.5 U/mg),混杂平均后,介入 8 mL~10 mL 45 ℃±2 ℃的水, 摇匀。盖上瓶塞置于 55 ℃±2 ℃水浴(5.3)中 2 h,每隔 10min 摇混一次。介入两滴约 0.1 mol/L 的碘 溶液,检验淀粉能否水解完好。若无蓝色出现,则水解完好,否则将毛氏抽脂瓶从新置于水浴中,直至 蓝色流掉,掏出冷却至室温。 6.1.2 不含淀粉的试样称取混杂平均的固体试样约 1.5 g,液体试样约 10g(准确到 0.1 mg)于毛氏 抽脂瓶(5.6)中,介入 10 mL 45 ℃±2 ℃的水,将试样洗入毛氏抽脂瓶(5.6)的小球中,充分混杂, 直到试样完好散开,冷却至室温。 GB 5413.362010 3 6.1.3 脂肪的提取向毛氏抽脂瓶(5.6)中介入 3.0 mL 氨水(4.5),混匀。置于 60 ℃±2 ℃水浴(5.3) 中 15 min~20 min,冷却至室温。介入 10 mL 乙醇(4.3)跟 1 滴刚果红溶液(4.16),混匀。再介入 25mL 乙醚(4.2),塞上软木塞,放到毛氏抽脂瓶(5.6)摇混器上震动 1 min,也可采用手动振摇措施, 再介入 25mL 煤油醚 (4.1) , 震动 1 min, 不低于 4000 转/分钟离心分层。 倾出上清液于脂肪搜集瓶 (5.8) 中,为第一次提取。在残剩试样液中再介入 5 mL 乙醇,25 mL 乙醚,25 mL 煤油醚按上述支配措施进 行第二次提取。用离心计心情(5.5)离心分层后倾出上清液与第一次的上清液兼并。将脂肪搜集瓶(5.8) 置于改动蒸发器(5.2)上,在 60 ℃±2 ℃通入氮气前提下改动蒸发除去溶剂,保管残渣,即为脂肪。 6.1.4 脂肪酸甲酯的制备将上述脂肪用正几椋4.4)消融并定容至 10.0 mL,掏出 3.0 mL 于 10 mL 具塞试管中,介入 0.3 mL 氢氧化钾-甲醇溶液(4.10)。盖紧瓶盖,涡旋振荡器(5.4)上猛烈振摇 2 min, 4000 转/分钟离心 5 min 后将上清液转入气相色谱试样瓶中,此为试样测定液。 6.2 测定 6.2.1 参考色谱前提 色谱柱填料为氰丙基芳基聚硅氧烷的毛细管柱,柱长100 m,内径0.25 mm,膜厚0.2 ?m;或整齐 功用的色谱柱。 进样口温度250 ℃;载气(N2) 。 检测器温度300 ℃。 分流比101。 进样量1.0 μL。 措施升温如表 1 所示。 表 1 措施升温前提 升温速度(℃/ min) 温度(℃) 坚持时间(min) 120 0 10 175 10 5 210 5 5 230 5 6.2.2 规范曲线的制备 在仪器最佳变乱前提下,对系列规范变乱液(4.14)区分进样,以峰面积为纵坐标,规范变乱液浓 度为横坐标绘制规范变乱曲线。 6.2.3 反式脂肪酸甲酯色谱峰的区分 对脂肪酸甲酯规范混杂溶液(4.15)进样,举行顺反脂肪酸甲酯疏散水平及定性的判定。反十八碳 一烯酸甲酯跟反十八碳二烯酸甲酯色谱峰的位置拜见附录A中的图A.1。 6.2.4 试样液的测定 将试样测定液注入气相色谱仪,试样测定液中反式脂肪酸甲酯峰位置拜见附录A图A.1。区分测定 地域C181t跟地域C182t的峰面积,查规范曲线掉掉试样测定液中反十八碳一烯酸甲酯跟反十八碳二 烯酸甲酯的质量浓度。 7 剖析结果的表述 试样中反十八碳一烯酸跟反十八碳二烯酸含量区分计为 X1跟 X2,按式(1)区分算计 100 21 bi ai i Mm MVc X 或 (1) GB 5413.362010 4 式中 X(1或2)试样中反十八碳一烯酸或反十八碳二烯酸含量,单元为毫克每百克(mg/100g) ; V试样的定容体积,单元毫升(mL); m试样质量,单元为克(g); ci试样测定液中反十八碳一烯酸甲酯或反十八碳二烯酸甲酯的质量浓度,单元为毫克每毫升 mg/mL; Mai反十八碳一烯酸或反十八碳二烯酸的分子量; Mbi反十八碳一烯酸甲酯或反十八碳二烯酸甲酯的分子量。 试样中反式脂肪酸的总含量 X,按式(2)算计 21 XXX(2) 式中 X反式脂肪酸的总含量,单元为毫克每百克(mg/100g) ; X1试样中反十八碳一烯酸的含量,单元为毫克每百克(mg/100g) ; X2试样中反十八碳二烯酸的含量,单元为毫克每百克(mg/100g) 。 以重复性前提下掉掉的两次自力测定结果的算术平均值表现,结果保管三位有用数字。 8 精致度 在重复性前提下掉掉两次自力测定结果的相对差值不得逾越跨过算术平均值的 10 。 9 其他 本规范检出限为反式脂肪酸总量 30 mg/kg。 GB 5413.362010 5 附录 A (资料性附录) 反式脂肪酸混杂规范溶液气相色谱图 A.1 反式脂肪酸混杂规范溶液气相色谱图 反式脂肪酸混杂规范溶液气相色谱图见图 A.1。 C180 C181 9t C181 9c C182 9t,12t C182 9c,12c C181 tC182 t 图 A.1 反式脂肪酸混杂规范溶液气相色谱图
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