GB 5413.35-2010发布稿 婴幼儿食物跟乳品中β-胡萝卜素的测定 发布稿.rarGB 5413.35-2010发布稿 婴幼儿食物跟乳品中β-胡萝卜素的测定 发布稿.rar

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中华人平易近共跟国国家规范中华人平易近共跟国国家规范 GB 5413.352010 食物僻静国家规范 婴幼儿食物跟乳品中β-胡萝卜素的测定 National food safety standard Determination of β-carotene in foods for infants and young children, milk and milk products 中 华 人 平易近 共 跟 国 卫 生 部中 华 人 平易近 共 跟 国 卫 生 部 发布 2010-03-26 发布 2010-06-01 实行 GB 5413.352010 I 前 言 本规范局部参考了国际剖析财学会(AOAC)2005.7 β-Carotene in supplement and raw material的方 法。 本标准附录A为模范性附录,附录B为资料性附录。 本规范系首次发布。 GB 5413.352010 1 食物僻静国家规范 婴幼儿食物跟乳品中β-胡萝卜素的测定 1 规模 本规范规则了婴幼儿食物跟乳品中β-胡萝卜素的测定方法。 本规范适用于婴幼儿食物跟乳品中β-胡萝卜素的测定。 2 模范性援用文件 本规范中援用的文件关于本规范的应用是必不可少的。 素日注日期的援用文件, 仅所注日期的版本 适用于本规范。素日不注日期的援用文件,其最新版本(包含全部的修正单)适用于本规范。 3 道理 试样经皂化后,使β-胡萝卜素完好变为游离态。用煤油醚萃取后,反相色谱法疏散,外标法定量。 4 试剂跟原料 除非尚有规则,本方法所用试剂均为剖析纯,水为 GB/T 6682 规则的一级水。 4.1 α-淀粉酶酶生气盼望≥1.5 U/mg。 4.2 无水硫酸钠(Na2SO4)。 4.3 抗坏血酸C6H8O6。 4.4 煤油醚沸程 30 ℃~60 ℃。 4.5 甲醇CH4O色谱纯。 4.6 乙腈C2H3N色谱纯。 4.7 三氯甲烷CHCl3色谱纯。 4.8 正几镃6H14色谱纯。 4.9 乙醇体积分数为 95 。 4.10 氢氧化钾溶液称固体氢氧化钾 250 g,介入 200 mL 水消融。临用前配制。 4.11 β-胡萝卜素规范品。 4.12 β-胡萝卜素规范溶液。 4.12.1 β-胡萝卜素规范蕴藏液(500 μg/mL)准确称取 β-胡萝卜素规范品(4.11)50 mg(准确到 0.1 mg),用正几椋4.8)定容至 100 mL 棕色容量瓶中。 注β-胡萝卜素规范蕴藏液需求-10 ℃以下避光贮存,应用限日不逾越跨过3个月。规范蕴藏液用前需校订,具体支配见 GB 5413.352010 2 附录A。 4.12.2 β-胡萝卜素规范中央液(100 μg/mL)从 β-胡萝卜素规范蕴藏液(4.12.1) 中准确移取 10.0 mL 溶液于 50 mL 棕色容量瓶中,用正几椋4.8)定容至刻度。 4.12.3 β-胡萝卜素规范变乱液从 β-胡萝卜素规范中央液(4.12.2)中区分准确移取 0.50、1.00、2.00、 3.00、4.00 mL 溶液转入 5 个 100 mL 棕色容量瓶中,用正几椋4.8)定容至刻度,掉掉浓度为 0.5、1.0、 2.0 、3.0 、4.0 μg/mL 的系列规范变乱液。 5 仪器跟设备 5.1 高效液相色谱仪,带紫外检测器。 5.2 改动蒸发器。 5.3 恒温磁力搅拌器20 ℃~80 ℃。 5.4 离心计心情转速≥5000 转/分钟。 5.5 剖析天平感量为 0.1 mg 。 5.6 氮吹仪。 5.7 造就箱60 ℃±2 ℃。 6 剖析措施 6.1 试样处置处分 6.1.1 淀粉类试样 称取混杂平均的固体试样约5 g或液体试样约50 g(均准确至0.0001 g)于250 mL三角瓶中,介入1.0 g抗坏血酸4.3,固体试样需用50 mL45 ℃~50 ℃的水消融并混杂平均。介入l g α-淀粉酶(4.1),向 三角瓶中充氮后盖上瓶塞,置60 ℃±2 ℃造就箱(5.7)内酶解30 min。 6.1.2 非淀粉类试样 称取混杂平均的固体试样约10 g或液体试样约50 g(均准确至0.0001 g),置于250 mL三角瓶中, 介入1.0 g抗坏血酸4.3,固体试样需用50 mL 45 ℃~50 ℃的水消融并混杂平均。 6.2 待测液的制备 6.2.1 皂化 将 100 mL 95乙醇 (4.9) 介入到上述试样溶液中, 混匀并介入 25 mL 氢氧化钾溶液 (4.10) 混匀,放入磁力棒,充入氮气排挤气氛,盖上胶塞。将 1000 mL 的烧杯中介入约 300 mL 的水,将烧杯 放在恒温磁力搅拌器(5.3)上,当水温控制在 53 ℃±2 ℃时,将三角瓶放入烧杯中,磁力搅拌皂化约 45 min 后,掏出立刻冷却到室温。 6.2.2 提取将皂化液全部转入 500 mL 分液漏斗中,介入 100 mL 煤油醚(4.4),悄然果断,排气, 盖好瓶塞,室温下震动 10 min 后静置分层,将水相转入另一分液漏斗中按上述方法举行第二次提取。 兼并无机相,用水洗至近中性。无机相同过无水硫酸钠(4.2)过滤脱水。滤液支出 500 mL 烧瓶中,于 改动蒸发器(5.2)上在 40 ℃±2 ℃的充氮前提下蒸至近干(毫不允许蒸干)。用煤油醚(4.4)消融残 渣并转移至 10 mL 容量瓶中定容。 从上述容量瓶中准确移取2.0 mL煤油醚溶液于10 mL螺盖试管中,在40 ℃±2 ℃氮吹仪(5.6)上吹 干。向试管中加1.0 mL正几椋4.8),震动消融残渣。再将试管以不低于5000 转/分钟的速度离心(5.4) 10 min,掏出静置至室温后待测。 GB 5413.352010 3 注实行支配过程中应细致避光。 6.3 色谱测定 6.3.1 参考色谱前提 色谱柱C18柱,250 mm4.6 mm,5 μm,或具整齐功用的色谱柱。 运动相三氯甲烷-腈-甲醇31285,将1 L的运动相中介入0.4 g的抗坏血酸,经0.45 μm膜过滤 后备用。 流速2.0 mL/min。 检测波长450 nm。 柱温35 ℃±1 ℃。 进样体积20 μL。 6.3.2 规范曲线的绘制 区分将 β-胡萝卜素规范变乱液4.12.3注入液相色谱仪中(色谱图拜见附录 B),掉掉峰面积。以 峰面积为纵坐标,以 β-胡萝卜素规范变乱液浓度为横坐标绘制规范曲线。 6.3.3 试样测定 将待测液 (6.2.2) 注入液相色谱仪中, 掉掉峰面积, 依据规范曲线掉掉待测液中β-胡萝卜素的浓度。 7 剖析结果的表述 试样中 β-胡萝卜素的含量按式(1)算计 2 10010 m c X(1) 式中 X试样中 β-胡萝卜素的含量,单元为微克每百克(μg/100g) ; c 从规范曲线掉掉待测液中 β-胡萝卜素的浓度,单元为微克每毫升(μg/mL) ; m 试样的质量,单元为克(g); 10样液体积。 注此算计结果为顺、反式 β-胡萝卜素的总量。 以重复性前提下掉掉的两次自力测定结果的算术平均值表现,结果保管三位有用数字。 8 精致度 在重复性前提下掉掉的两次自力测定结果的相对差值不得逾越跨过算术平均值的10 。 9 其他 本规范检出限为 2 μg/100g。 GB 5413.352010 4 附录 A (模范性附录) 规范溶液浓度校订方法 β-胡萝卜素规范蕴藏液配制后需求校订,具体支配如下 取β-胡萝卜素规范蕴藏液(浓度为500 μg/mL)10 μL,注入含3.0 mL正几榈谋壬皿中,混匀。测 定其吸光值,比色杯厚度为1 cm,以正几槲空白,入射光波长为450 nm,平行测定3次,取均值。 按(2)式算计溶液浓度 E A X 01.0 01.3 (2) 式中 Xβ-胡萝卜素溶液浓度,单元为微克每毫升(μg/mL); Aβ-胡萝卜素的紫外吸光值; Eβ-胡萝卜素在正几槿芤褐校入射光波长为450 nm,比色杯厚度为1 cm,溶液浓度为1 mg/L 的吸光系数为0.2638; 01. 0 01. 3 测定过程中稀释倍数的换算系数。 GB 5413.352010 5 附录 B (资料性附录) 规范品液相色谱图 B.1 β-胡萝卜素规范品液相色谱图 β-胡萝卜素规范品液相色谱图见图 B.1。 图 B.1 β-胡萝卜素规范品色谱图
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