GB 5413.12-2010发布稿 婴幼儿食物跟乳品中维生素B2的测定 发布稿.rarGB 5413.12-2010发布稿 婴幼儿食物跟乳品中维生素B2的测定 发布稿.rar

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中华人平易近共跟国国家规范中华人平易近共跟国国家规范 GB 5413.122010 食物僻静国家规范 婴幼儿食物跟乳品中维生素 B2的测定 National food safety standard Determination of vitamin B2 in foods for infants and young children, milk and milk products 中 华 人 平易近 共 跟 国 卫 生 部中 华 人 平易近 共 跟 国 卫 生 部 发布 2010-03-26 发布 2010-06-01 实行 GB 5413.122010 I 前 言 本规范交流GB/T 5413.12-1997婴幼儿食物跟乳粉 维生素B2的测定。 本规范与GB/T 5413.12-1997比拟,重要变革如下 规范名称改为婴幼儿食物跟乳品中维生素B2的测定。 取消了方法一荧光分光光度法; 对原规范的构造举行了修正; 混杂酶液中增加了酸性磷酸酶,以谋划增加核黄素磷酸盐作为维生素B2强化剂的样品测定; 样品处置处分方法中增加了“抑止强光照耀”的细致点; 外标法定量采用多点规范曲线法; 在结果算计时明确样品中维生素B2含量以核黄素计; 增加附录A规范溶液的液相色谱图。 本标准附录A为资料性附录。 本规范所交流规范的历次版本发布状况为 GB 5413-1985、GB/T 5413.12-1997。 GB 5413.122010 1 食物僻静国家规范 婴幼儿食物跟乳品中维生素B2的测定 1 规模 本规范规则了婴幼儿食物跟乳品中维生素 B2的测定方法。 本规范适用于婴幼儿食物跟乳品中维生素 B2的测定。 2 模范性援用文件 本规范中援用的文件关于本规范的应用是必不可少的。 素日注日期的援用文件, 仅所注日期的版本 适用于本规范。素日不注日期的援用文件,其最新版本(包含全部的修正单)适用于本规范。 3 道理 试样在稀盐酸状况中恒温水解,酶解,经 C18反相色谱柱疏散,用荧光检测器(Ex462 nm,Em 522 nm)检测,外标法定量。 4 试剂跟原料 除非尚有规则,本方法所用试剂均为剖析纯,水为 GB/T 6682 规则的一级水。 4.1 盐酸。 4.2 三水乙酸钠。 4.3 冰乙酸。 4.4 甲醇色谱纯。 4.5 维生素 B2(核黄素)规范品纯度≥99。 4.6 盐酸(11) 量取 100 mL 盐酸(4.1)愚钝倒入 100 mL 水中,混匀。 4.7 盐酸(0.1 mol/L) 吸取 9 mL 盐酸(4.1) ,溶于 1000 mL 水中。 4.8 盐酸(0.01 mol/L) 吸取 0.1 mol/L 盐酸(4.7)50 mL,用水稀释并定容至 500 mL。 4.9 乙酸钠溶液(0.05 mol/L) 称取 6.80 g 三水乙酸钠(4.2) ,加 900 mL 水消融,用冰乙酸调 pH 值 至 4.0~5.0,用水定容至 1000 mL。经 0.45 μm 微孔滤膜过滤。 4.10 乙酸钠溶液(2.0 mol/L) 称取 27.22 g 三水乙酸钠(4.2) ,用水消融并定容至 100 mL。 4.11 混杂酶溶液 称取2.345 g木瓜卵白酶 (生气盼望单元≥600 U/g) 、 1.175 g淀粉酶 (生气盼望单元≥4000 U/g) 跟 1.000 g 酸性磷酸酶(生气盼望单元≥4000 U/g) ,用水定容至 50 mL。临用前配制。 4.12 规范溶液 GB 5413.122010 2 4.12.1 维生素 B2 规范蕴藏液(250 μg/mL)称取 25mg (准确至 0.1 mg)维生素 B2规范品(4.5) , 介入盐酸(4.6)2 mL,超声消融后,立刻用水转移并定容至 100 mL。置于棕色玻璃容器中在 0℃~4℃ 冰箱贮存,生涯期为 3 个月。 4.12.2 维生素 B2 规范中央液准确吸取 4.00 mL 规范蕴藏液(4.12.1) ,用水稀释并定容至 100 mL, 此溶液中维生素 B2浓度为 10 μg/mL。临用前配制。 4.12.3 维生素 B2 规范系列变乱液区分吸取维生素 B2 规范中央液(4.12.2)0.00 mL、0.50 mL、 1.00 mL、 2.00 mL、 5.00 mL、 10.00 mL, 用水消融并定容至 100 mL。 该规范系列浓度区分为 0.00 μg/mL、 0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL。临用前配制。 5 仪器跟设备 5.1 高效液相色谱仪,带有荧光检测器。 5.2 高压灭菌锅。 5.3 pH 计精度为 0.01。 5.4 构造捣碎机。 5.5 0.45 μm 微孔水相滤膜。 5.6 天平感量 1 mg 跟 0.1 mg。 6 剖析措施 6.1 试样的处置处分 称取5 g~10 g(准确至0.01 g) 试样 (若有需求, 将试样放入捣碎机中捣碎; 试样中含维生素B2 5 μg 以上)于100 mL三角瓶中,加60 mL 0.1 mol/L盐酸(4.7),充分摇匀,用棉花塞跟牛皮纸封口,放入 高压灭菌锅内,在121 ℃下坚持30 min,待冷却至40 ℃以下后掏出,轻摇数次;用2.0 mol/L乙酸钠溶液 (4.10)调pH值至4.0阁下,介入2.0 mL混杂酶溶液(4.11),摇匀后,置于37℃造就箱中留宿;将酶解 液转移至100 mL容量瓶中,用水定容至刻度,用定量滤纸过滤,取滤液再经0.45 μm滤膜(5.5)过滤, 取滤液备用。 注支配过程应抑止强光照耀。 6.2 测定 6.2.1 参考色谱前提 色谱柱C18反相色谱柱(粒径 5 μm,250 mm 4.6 mm)或整齐功用的色谱柱。 运动相0.05 mol/L 乙酸钠溶液(4.9)甲醇(4.4) 65+35。 流速1.0 mL/min。 检测波长激起波长 462 nm,发射波长 522 nm。 进样量20 μL。 6.2.2 规范曲线绘制 将维生素 B2 规范系列变乱液(4.12.3)依次举行色谱测定(其规范样品色谱图拜见附录 A 中图 A.1) ,记载色谱峰面积。以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标,绘制规范曲线。 6.2.3 试液测定 将试液举行色谱测定,从规范曲线中查得试液响应的浓度。 GB 5413.122010 3 6.2.4 空白试验 除不加试样外,按上述支配措施举行。 7 剖析结果的表述 试样中维生素B2的含量按式(1)算计 cV100 X = (1) m1000 式中 X试样中维生素 B2的含量(以核黄素计) ,单元为毫克每百克(mg/100 g) ; c试液的进样浓度,单元为微克每毫升(μg/mL) ; V试样定容体积,单元为毫升(mL) ; m试样质量,单元为克(g) 。 以重复性前提下掉掉的两次自力测定结果的算术平均值表现,结果保管三位有用数字。 8 精致度 在重复性前提下掉掉的两次自力测定结果的相对差值不得逾越跨过算术平均值的 10 。 9 其他 本规范定量限为当取样量为 10.00 g 时,0.05 mg/100 g。 GB 5413.122010 4 附录 A (资料性附录) 维生素 B2规范溶液的液相色谱图 A.1 维生素 B2规范溶液的液相色谱图 维生素 B2规范溶液的液相色谱图见图 A.1。 图 A.1 维生素 B2规范溶液的液相色谱图
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